Examen de muestras al microscopio
Según la manipulación que efectuemos sobre la muestra a observar y según los colorarntes que empleemos durante el proceso, podemos hablar de diferentes modalidades de tinción.
Examen microscópico directo de las muestras clínicas
Sin
Tinción
No
se utiliza ningún tipo de colorante.
Es el montaje directo húmedo o examen en fresco: las muestras se extienden directamente sobre la superficie de un portaobjetos para su observación. El material que es demasiado espeso para permitar la diferenciación de sus elementos puede diluirse con igual volumen de solución salina fisiológica estéril. Se deposita suavemente un cubreobjetos sobre la superficie del material.
Este tipo de preparación se emplean para detectar trofozoítos móviles de parásitos intestinales como Giardia, Entamoeba, huevos y quistes de otros parásitos, larvas y gusanos adultos, Trichomonas, hifas de hongos, etc
En la imagen: Candida sp en un examen en fresco.
Examen microscópico de las muestras clínicas
levemente modificadas
Tinción
Simple
Se
utiliza un solo colorante, por lo que todas las estructuras celulares se tiñen
con la misma tonalidad (Tinta china, Azul Metileno de Loeffler, Azul de lactofenol).
El Hidróxido de potasio al 10% (solución de KOH) permite ver elementos de hongos ya que el KOH digiere parcialmente los componentes proteicos, por ejemplo de la célula huésped, pero no actúa sobre los polisacáridos de las paredes celulares de los hongos.
La tinta china o Nigrosina permite observar células levaduriformes capsuladas (Cryptococcus), sobre todo en LCR. Los polisacáridos capsulares rechazan la tinta china y la cápsula aparece como un halo claro alrededor de los microorganismos. Azul de metileno de Loeffler puede agregarse a las preparaciones en fresco de heces para observar la presencia de leucocitos.
En la imagen: Cryptococcus neoformans en una tinción con tinta china.
Examen microscópico de las muestras clínicas
muy modificadas
Tinción
Diferencial
Se
utilizan varios colorantes combinados. Las estructuras celulares se diferencian
en función de los diferentes colorantes que fijan de acuerdo con su propia
constitución química.
Los ejemplos clásicos sería la tinción de GRAM o la de Ziehl-Neelsen
En la imagen: BGN y levaduras en una tinción GRAM
microfotografía: Daniel Val
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